Panduan dan Tabel Referensi Lengkap MPN 3-Tabung

Wed, 27 May 2026 10:00:00 +0700

Dokumen ini merupakan panduan referensi laboratorium untuk membaca, menginterpretasikan, dan menghitung estimasi kepadatan populasi mikrob menggunakan metode statistik Most Probable Number (MPN) dengan seri 3-tabung. Tabel dan aturan pembacaan di bawah ini merujuk pada standar baku U.S. Food and Drug Administration – Bacteriological Analytical Manual (FDA BAM Appendix 2).

Note

Kapan menggunakan MPN? Metode MPN sangat ideal untuk mengestimasi konsentrasi bakteri target yang rendah ($< 10\text{--}100\text{ CFU/g}$), sampel dengan matriks partikulat yang mengganggu perhitungan koloni pada cawan (pour/spread plate), atau ketika memerlukan tahap pemerkayaan (enrichment) selektif.

1. Prinsip Dasar

Tabel standar MPN 3-tabung didasarkan pada inokulasi sampel menggunakan 3 tingkat pengenceran desimal berturut-turut (faktor pengenceran kelipatan 10).

Volume atau bobot ekuivalen sampel asli (inoculum) yang menjadi dasar perhitungan tabel standar ini adalah:

Tabung Seri 1: $0.1\text{ g}$ atau $\text{mL}$ (setara dengan $1\text{ mL}$ dari pengenceran $10^{-1}$)
Tabung Seri 2: $0.01\text{ g}$ atau $\text{mL}$ (setara dengan $1\text{ mL}$ dari pengenceran $10^{-2}$)
Tabung Seri 3: $0.001\text{ g}$ atau $\text{mL}$ (setara dengan $1\text{ mL}$ dari pengenceran $10^{-3}$)

2. Tabel Referensi MPN 3-Tabung (Inokulum 0.1, 0.01, dan 0.001 g/mL)

Nilai pada tabel berikut merupakan Indeks MPN per gram atau per mL sampel asli beserta interval kepercayaan 95% (95% Confidence Interval), dengan asumsi seri pengenceran yang diinokulasikan adalah $10^{-1}$, $10^{-2}$, dan $10^{-3}$.

Kombinasi Positif ($10^{-1} : 10^{-2} : 10^{-3}$)	Indeks MPN (per g atau mL)	Batas Kepercayaan 95% (Bawah – Atas)
0 - 0 - 0	$< 0.3$	$0.00 - 0.95$
0 - 0 - 1	$0.3$	$0.01 - 1.7$
0 - 1 - 0	$0.3$	$0.01 - 1.7$
0 - 1 - 1	$0.6$	$0.05 - 2.5$
0 - 2 - 0	$0.6$	$0.05 - 2.5$
1 - 0 - 0	$0.4$	$0.02 - 1.7$
1 - 0 - 1	$0.7$	$0.07 - 2.4$
1 - 0 - 2	$1.1$	$0.10 - 4.4$
1 - 1 - 0	$0.7$	$0.07 - 2.5$
1 - 1 - 1	$1.1$	$0.15 - 4.5$
1 - 2 - 0	$1.1$	$0.15 - 4.5$
1 - 2 - 1	$1.5$	$0.30 - 5.5$
2 - 0 - 0	$0.9$	$0.15 - 3.5$
2 - 0 - 1	$1.4$	$0.30 - 5.5$
2 - 0 - 2	$2.0$	$0.40 - 7.5$
2 - 1 - 0	$1.5$	$0.30 - 6.5$
2 - 1 - 1	$2.0$	$0.40 - 7.6$
2 - 1 - 2	$2.7$	$0.70 - 8.5$
2 - 2 - 0	$2.1$	$0.40 - 7.6$
2 - 2 - 1	$2.8$	$0.80 - 9.4$
2 - 2 - 2	$3.5$	$1.00 - 13.0$
2 - 3 - 0	$2.9$	$0.90 - 9.4$
2 - 3 - 1	$3.6$	$1.00 - 13.0$
3 - 0 - 0	$2.3$	$0.46 - 9.4$
3 - 0 - 1	$3.8$	$0.80 - 13.0$
3 - 0 - 2	$6.4$	$1.60 - 20.0$
3 - 1 - 0	$4.3$	$0.90 - 18.1$
3 - 1 - 1	$7.5$	$1.70 - 20.0$
3 - 1 - 2	$12.0$	$3.00 - 29.0$
3 - 1 - 3	$16.0$	$3.00 - 38.0$
3 - 2 - 0	$9.3$	$1.80 - 36.0$
3 - 2 - 1	$15.0$	$3.00 - 48.0$
3 - 2 - 2	$21.0$	$5.00 - 63.0$
3 - 2 - 3	$29.0$	$8.00 - 89.0$
3 - 3 - 0	$24.0$	$4.00 - 99.0$
3 - 3 - 1	$46.0$	$9.00 - 198.0$
3 - 3 - 2	$110.0$	$30.0 - 380.0$
3 - 3 - 3	$> 110.0$	—

3. Panduan Pemilihan Seri Pengenceran

Dalam pengujian rutin, kita sering menginokulasi lebih dari 3 tingkat pengenceran (misalnya 5 seri dari $10^{-1}$ hingga $10^{-5}$) agar rentang populasi bakteri yang tinggi tetap terukur. Untuk membaca tabel MPN, Anda harus memilih 3 tingkat pengenceran berurutan guna membentuk kode 3 digit.

Aturan Penentuan 3 Digit MPN:

Aturan 1 (Standar): Pilih pengenceran tertinggi (paling encer) yang seluruh tabungnya positif (bernilai 3), diikuti dua tingkat pengenceran berikutnya.
- Hasil pengamatan ($10^{-1}$ s.d. $10^{-5}$): 3 - 3 - 2 - 1 - 0
- Cara memilih: Ambil angka 3 yang paling kanan (pada $10^{-2}$) beserta dua pengenceran setelahnya ($10^{-3}$ dan $10^{-4}$).
- Kombinasi terpilih: 3 - 2 - 1 (mewakili seri $10^{-2}, 10^{-3}, 10^{-4}$).
Aturan 2 (Semua $< 3$): Jika tidak ada pengenceran yang seluruh tabungnya positif, pilih 3 pengenceran terendah (paling pekat).
- Hasil pengamatan ($10^{-1}$ s.d. $10^{-5}$): 2 - 1 - 0 - 0 - 0
- Cara memilih: Ambil tiga seri pengenceran pertama.
- Kombinasi terpilih: 2 - 1 - 0 (mewakili seri $10^{-1}, 10^{-2}, 10^{-3}$).
Aturan 3 (Tabung positif di pengenceran tinggi): Jika masih terdapat hasil positif setelah 3 seri yang dipilih, jumlahkan nilai positif tersebut ke digit ketiga.
- Hasil pengamatan ($10^{-1}$ s.d. $10^{-5}$): 3 - 2 - 0 - 1 - 0
- Cara memilih: Tiga seri utama yang dipilih berdasarkan Aturan 1 adalah 3 - 2 - 0 ($10^{-1}, 10^{-2}, 10^{-3}$). Karena terdapat angka 1 pada pengenceran $10^{-4}$, tambahkan angka tersebut ke digit ketiga ($0 + 1 = 1$).
- Kombinasi terpilih: 3 - 2 - 1 (tetap mewakili seri $10^{-1}, 10^{-2}, 10^{-3}$).

4. Rumus Konversi Faktor Pengenceran

Karena tabel standar di atas dikalibrasi untuk seri $10^{-1}, 10^{-2}, 10^{-3}$ (di mana tabung tengah memiliki inokulum $0.01\text{ g/mL}$), penggunaan seri pengenceran yang lebih tinggi mengharuskan Anda mengalikan nilai Indeks MPN dari tabel dengan Faktor Koreksi Pengenceran:

$$\text{MPN/g atau mL} = \text{Indeks MPN Tabel} \times \frac{0.01}{V_{\text{tengah}}}$$

Atau dalam bentuk ekuivalen yang sering digunakan di laboratorium:

$$\text{MPN/g atau mL} = \text{Indeks MPN Tabel} \times \frac{10}{\text{Faktor Pengenceran Tabung Pertama yang Dipilih}}$$

Keterangan:

$V_{\text{tengah}}$ = Massa atau volume sampel asli ($\text{g}$ atau $\text{mL}$) pada tabung seri tengah dari 3 kombinasi yang dipilih (misal: untuk seri $10^{-2}, 10^{-3}, 10^{-4}$, maka $V_{\text{tengah}} = 10^{-3} = 0.001\text{ g}$).

5. Contoh Perhitungan Lengkap

Kasus	Hasil Pengamatan ($10^{-1}$ : $10^{-2}$ : $10^{-3}$ : $10^{-4}$ : $10^{-5}$)	Seri Terpilih	Kode MPN	Indeks Tabel	$V_{\text{tengah}}$ ($\text{g}$)	Perhitungan Akhir ($\text{MPN/g}$)
Sampel A	`3 - 3 - 2 - 1 - 0`	$10^{-2}, 10^{-3}, 10^{-4}$	3 - 2 - 1	$15.0$	$0.001$	$15.0 \times \frac{0.01}{0.001} = \mathbf{150\text{ MPN/g}}$
Sampel B	`3 - 3 - 3 - 1 - 0`	$10^{-3}, 10^{-4}, 10^{-5}$	3 - 1 - 0	$4.3$	$0.0001$	$4.3 \times \frac{0.01}{0.0001} = \mathbf{430\text{ MPN/g}}$
Sampel C	`2 - 0 - 0 - 0 - 0`	$10^{-1}, 10^{-2}, 10^{-3}$	2 - 0 - 0	$0.9$	$0.01$	$0.9 \times \frac{0.01}{0.01} = \mathbf{0.9\text{ MPN/g}}$

Referensi

Blodgett, R. (2020). BAM Appendix 2: Most Probable Number from Serial Dilutions. U.S. Food and Drug Administration (FDA) Bacteriological Analytical Manual.