Panduan dan Tabel Referensi Lengkap MPN 3-Tabung
Tabel lengkap Most Probable Number (MPN) seri 3-tabung beserta panduan perhitungan dan pemilihan tingkat pengenceran.
REFERENSI LABORATORIUM
Tabel Lengkap Most Probable Number (MPN) 3-Tabung dan Panduan Penggunaannya
Dokumen ini merupakan panduan lengkap untuk membaca, menginterpretasikan, dan menghitung jumlah mikrob menggunakan metode statistik Most Probable Number (MPN) dengan seri 3-tabung. Tabel yang digunakan merujuk pada standar umum bakteriologi (seperti FDA BAM).
1. PRINSIP DASAR
Tabel standar MPN 3-tabung di bawah ini didasarkan pada inokulasi sampel dengan 3 tingkat pengenceran berturut-turut yang menurun secara desimal (berkelipatan 10). Volume inokulum standar yang menjadi dasar perhitungan tabel ini adalah:
- Tabung Seri 1: 0.1 g/mL (setara pengenceran 10⁻¹)
- Tabung Seri 2: 0.01 g/mL (setara pengenceran 10⁻²)
- Tabung Seri 3: 0.001 g/mL (setara pengenceran 10⁻³)
2. TABEL LENGKAP MPN 3-TABUNG (Inokulum 0.1, 0.01, dan 0.001 g)
Catatan: Nilai di bawah ini adalah Indeks MPN per gram atau per mL sampel asli, dengan asumsi pengenceran yang digunakan adalah 10⁻¹, 10⁻², dan 10⁻³.
| Kombinasi Tabung Positif (10⁻¹ : 10⁻² : 10⁻³) | Indeks MPN (per g/mL) | Batas Kepercayaan 95% (Bawah - Atas) |
|---|---|---|
| 0 - 0 - 0 | < 0.3 | 0.0 - 0.95 |
| 0 - 0 - 1 | 0.3 | 0.01 - 1.7 |
| 0 - 1 - 0 | 0.3 | 0.01 - 1.7 |
| 0 - 1 - 1 | 0.6 | 0.05 - 2.5 |
| 0 - 2 - 0 | 0.6 | 0.05 - 2.5 |
| 1 - 0 - 0 | 0.4 | 0.02 - 1.7 |
| 1 - 0 - 1 | 0.7 | 0.07 - 2.4 |
| 1 - 0 - 2 | 1.1 | 0.1 - 4.4 |
| 1 - 1 - 0 | 0.7 | 0.07 - 2.5 |
| 1 - 1 - 1 | 1.1 | 0.15 - 4.5 |
| 1 - 2 - 0 | 1.1 | 0.15 - 4.5 |
| 1 - 2 - 1 | 1.5 | 0.3 - 5.5 |
| 2 - 0 - 0 | 0.9 | 0.15 - 3.5 |
| 2 - 0 - 1 | 1.4 | 0.3 - 5.5 |
| 2 - 0 - 2 | 2.0 | 0.4 - 7.5 |
| 2 - 1 - 0 | 1.5 | 0.3 - 6.5 |
| 2 - 1 - 1 | 2.0 | 0.4 - 7.6 |
| 2 - 1 - 2 | 2.7 | 0.7 - 8.5 |
| 2 - 2 - 0 | 2.1 | 0.4 - 7.6 |
| 2 - 2 - 1 | 2.8 | 0.8 - 9.4 |
| 2 - 2 - 2 | 3.5 | 1.0 - 13.0 |
| 2 - 3 - 0 | 2.9 | 0.9 - 9.4 |
| 2 - 3 - 1 | 3.6 | 1.0 - 13.0 |
| 3 - 0 - 0 | 2.3 | 0.46 - 9.4 |
| 3 - 0 - 1 | 3.8 | 0.8 - 13.0 |
| 3 - 0 - 2 | 6.4 | 1.6 - 20.0 |
| 3 - 1 - 0 | 4.3 | 0.9 - 18.1 |
| 3 - 1 - 1 | 7.5 | 1.7 - 20.0 |
| 3 - 1 - 2 | 12.0 | 3.0 - 29.0 |
| 3 - 1 - 3 | 16.0 | 3.0 - 38.0 |
| 3 - 2 - 0 | 9.3 | 1.8 - 36.0 |
| 3 - 2 - 1 | 15.0 | 3.0 - 48.0 |
| 3 - 2 - 2 | 21.0 | 5.0 - 63.0 |
| 3 - 2 - 3 | 29.0 | 8.0 - 89.0 |
| 3 - 3 - 0 | 24.0 | 4.0 - 99.0 |
| 3 - 3 - 1 | 46.0 | 9.0 - 198.0 |
| 3 - 3 - 2 | 110.0 | 30.0 - 380.0 |
| 3 - 3 - 3 | > 110.0 | - |
3. PANDUAN PENGGUNAAN DAN PERHITUNGAN
Dalam praktiknya, seringkali kita menginokulasi lebih dari 3 tingkat pengenceran (misalnya 5 tingkat: 10⁻¹, 10⁻², 10⁻³, 10⁻⁴, dan 10⁻⁵) untuk memastikan kita menangkap rentang jumlah bakteri yang tepat.
Jika Anda memiliki lebih dari 3 tingkat pengenceran, Anda harus memilih 3 tingkat pengenceran yang berurutan untuk membentuk kode MPN (kombinasi 3 digit angka).
Aturan Pemilihan 3 Tingkat Pengenceran Berurutan:
- Pilih pengenceran tertinggi (paling encer) yang seluruh tabungnya positif (yaitu bernilai 3), dan dua pengenceran berikutnya.
- Contoh: Anda menanam pengenceran 10⁻¹ sampai 10⁻⁵ dengan hasil positif:
3 - 3 - 2 - 1 - 0. - Pilihan: Ambil
3yang terakhir (pengenceran 10⁻²) dan dua setelahnya. Kombinasinya menjadi 3 - 2 - 1 (mewakili 10⁻², 10⁻³, 10⁻⁴).
- Contoh: Anda menanam pengenceran 10⁻¹ sampai 10⁻⁵ dengan hasil positif:
- Jika tidak ada pengenceran yang bernilai 3, pilih 3 pengenceran terendah (paling pekat).
- Contoh: Hasil positif:
2 - 1 - 0 - 0 - 0. - Pilihan: Ambil tiga yang pertama. Kombinasinya menjadi 2 - 1 - 0 (mewakili 10⁻¹, 10⁻², 10⁻³).
- Contoh: Hasil positif:
- Jika ada nilai positif setelah pengenceran yang dipilih, jumlahkan nilai positif tersebut ke tabung ketiga.
- Contoh: Hasil positif:
3 - 2 - 0 - 1 - 0. - Pilihan: Karena Anda harus memilih
3dan dua angka setelahnya (3 - 2 - 0), tetapi ada angka1di pengenceran berikutnya, angka1ini “didorong” dan ditambahkan ke angka terakhir (0 + 1 = 1). Kombinasi akhirnya menjadi 3 - 2 - 1 (mewakili 10⁻¹, 10⁻², 10⁻³).
- Contoh: Hasil positif:
Rumus Konversi Faktor Pengenceran (Kalibrasi)
Karena Tabel MPN di atas didesain khusus untuk seri 10⁻¹, 10⁻², dan 10⁻³, maka jika Anda menggunakan 3 seri pengenceran yang berbeda, Anda wajib mengalikan nilai dari tabel dengan faktor koreksi berikut:
Rumus:
Nilai MPN/g = (Nilai Indeks dari Tabel) × (10 / Volume sampel inokulum pada tabung tengah)